Peptidinukleiinihappo (PNA) on keinotekoinen nukleiinihappomolekyyli, jolla on useita etuja luonnolliseen DNA:han ja RNA:han verrattuna, kuten korkea selektiivisyys, vahva affiniteetti ja stabiilisuus. Kiinteäfaasisynteesi on yksi tärkeimmistä PNA:n syntetisointimenetelmistä, jossa on seuraavat erityiset vaiheet:
Sopivien suojaryhmien valinta: Suojaryhmien saattaminen reagoimaan PNA-prekursorin amino- tai karboksyyliryhmien kanssa muodostamaan suojaryhmien estereitä tai amideja.
Liittäminen polymeerihartsiin: Suojaryhmällä modifioitu PNA-esiaste liitetään polymeerihartsiin, tyypillisesti käyttämällä polymeerihartsia, jonka hiiliketjun pituus on 20-30 aminohappotähdettä.
Synteesisyklin toistaminen: mukaan lukien N-terminaalisen suojaryhmän poistaminen; Lisää seuraava aminohappoyksikkö; Suorita N-liittimen suojaus uudelleen.
Suojauksen poisto ja erotus: Synteesin jälkeen PNA-peptidiketju irrotetaan polymeerihartsista alkalisella käsittelyllä tai happohydrolyysillä, ja kaikki suojaryhmät poistetaan PNA-tuotteen saamiseksi.
Tällä menetelmällä voidaan tehokkaasti syntetisoida jopa usean sadan nukleotidin pituisia PNA-molekyylejä, ja syntetisoidut tuotteet ovat erittäin puhtaita, joten ne soveltuvat laajamittaiseen tuotantoon.
Käytännön sovelluksissa yleisillä automaattisilla syntetisaattoreilla aggregoidun PNA:n puhtaus ei kuitenkaan ole ihanteellinen. HiPep Research Institute on kehittänyt uuden synteettisen menetelmän, jolla voidaan tuottaa erittäin puhtaita PNA-tuotteita. Tämä menetelmä ratkaisee joitain perinteisen synteesin ongelmia, kuten kalliita komponenttien hintoja, suojaryhmien helpon steerisen esteen ja monomeerin puhtauden merkittävän vaikutuksen kohde-PNA:n biologiseen aktiivisuuteen. Standardisynteesialue on 10-15 emästä ja synteesille. Yli 16 kantaa on erikoistilaus, joka vaatii erillisen yhteydenoton toimittajaan
Lisäksi PNA-synteesiin liittyy myös erilaisia modifikaatiomenetelmiä, kuten fluoresenssimodifikaatiota, biotiinimodifikaatiota, peptidimodifiointia, glykosylaatiota ja DNA-modifikaatiota erilaisten tutkimustarpeiden täyttämiseksi. Siksi on erittäin tärkeää valita sopivat synteesimenetelmät ja -tekniikat tiettyyn sovellukseen skenaariot ja vaatimukset.
